Erişkin sıçan testisinin seminifer tübüllerinde ısı şoku 70 proteininin gösterilmesi: bir immunohistokimyasal çalışma

Abstract

Amaç: Erişkin sıçanların testis dokusu seminifer tübüllerinde 70 kDa Isı Şoku Proteininin (IŞP70) immunolokalizasyonunun Avidin-Biotin-Peroksidaz bo¬yama yöntemi ile immunohistokimyasal olarak gösteril¬mesi amaçlanmıştır. Gereç ve Yöntem: Çalışmamızda, 5 adet 13-14 haftalık, 210±5 gr ağırlığında erkek Wistar albino sıçanlar kullanıldı. Ketamin anestezisi altında sol ventrikülden kanlan alınarak öldürülen sıçanlann testisleri komşu dokulardan temizlenerek çıkanldı ve tartıldı. Alınan testisler Bouin solüsyonunda tespit edildi. Testislerden alınan doku örnekleri rutin takip işlemle-rinden geçirilerek, parafine gömüldü. Parafın bloklardan 5pm kalınlıkta yapılan kesitler poly-L-lysine ile kaplanan lamlara alındı. Avidin-Biyotin-Peroksidaz boyama yöntemi kullanıla-rak 1ŞP70 ile boyandı. Bulgular: Özellikle spermatositlerin sitoplazmalarında IŞP70 immunoreaksiyonunu gösteren yoğun bir boyanma görüldü. Spermatositlerden lümene doğru uzanan spermatidlerin ve spermatazoaların sitoplazmalarında ve özellikle lümen çevresinde yoğunlaşan belirgin ve spesifik bir IŞP70 immunolokalizasyonu saptandı. Sonuç: Avidin-Biyotin-Peroxidaz boyama yöntemi IŞP70’in immunolokalizasyonunun saptanması açısından duyarlı ve spesifik bir yöntemdir.

Objective: We aimed to demonstrate the immunolocation of heat shock 70 protein (HSP70) in the seminiferous tubules of the testes tissues of adult rats by Avidin-Biotin Peroxidase staining method. Materials and methods: In our study, 5 male Wistar albi¬no rats (age: 13-14 weeks, mean weight: 210±5 gr) were used. The rats were killed by their blood samples were obtained from the left ventricles while they were under Ketamine anesthesia. Then, the testes of the rats were dissected from surrounding tissues and weighed. The testes were fixed in Bouin solution. After dehydratation procedures, the testes samples were blocked in paraffin. Sections, 5 pm in thickness were cut by a microtome and were mounted on poly L-Iysine covered slides. HSP70 was stained through Avidin-Biotin-Peroxidase staining method. Results: A dense staining indicating HSP70 immunoreaction was observed particularly in the cytoplasms of the spermatocytes. This was in the form of a marked and specific HSP70 immunolocation extending from the spermatocytes to the lumen, increasing in density around the lumen. Conclusion: Avidin-Biotin-Peroxidase staining is sensitive and specific immunohistochemical method in detecting HSP70 synthesis in meiotic division stage of spermatogenesis.